样本收集与存储方法

l 血清样本处理

全血标本请于室温放置2小时或2 - 8°C过夜后于2 - 8°C 1,000 x g离心15分钟，取上清即可立即检测；或进行分装，并将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。解冻后的样品应再次离心，然后检测。

l 血浆样本处理

可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1,000 x g离心15分钟，取上清即可立即检测；或进行分装，并将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。解冻后的样品应再次离心，然后检测。

l 细胞培养上清样本处理

标本于2 - 8°C 1,000 x g离心15分钟取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20°C或-80°C保存。避免反复冻融。

l 尿液样本处理

用无菌管收集尿液于2 - 8°C 1,000 x g离心15分钟取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20°C或-80°C保存。避免反复冻融。试验前再次离心，以去除在样本保存期间可能出现的一些沉淀。

l 组织样本处理

取100 mg组织，用1X PBS洗去血污。剪成小块放入组织研磨器(匀浆管)中，加入1 mL 1X PBS，制成匀浆，然后置于-20°C过夜。经过反复冻融2次处理破坏细胞膜后，将组织匀浆于2 - 8°C 5,000 x g离心5分钟取上清。取适量上清液立即进行实验，或将上清分装保存于-20°C或-80°C。解冻后的样品应再次离心，然后检测。避免反复冻融。

l 细胞裂解液样本处理

将长满细胞的培养瓶放置在冰上，用吸液管吸出培养液。加入足够的冷的1X PBS (pH 7.2-7.4)在培养瓶中充分洗涤细胞表面，以洗去瓶中残留的培养基，倒掉1X PBS。尽可能吸干残留的1X PBS，尽量在冰上操作。将清洗过的细胞转移到合适的离心管中，用1X PBS (pH 7.2-7.4)稀释到浓度为100 million/mL。然后置于-20°C过夜。经过2轮反复冻融破坏细胞壁后，于2 - 8°C 5,000 x g离心5分钟取上清，上清即可立即检测；或进行分装，并将标本放于-20°C保存，但应避免反复冻融。解冻后的样品应再次离心，然后检测。

l 奶样样本处理

标本于2 - 8° C，3,000 x g离心15分钟，收集液体部分。取上清，再放2 - 8°C 静置30分钟，凝固之后取中间液体；或进行分装，并将标本放于-20°C保存，但应避免反复冻融。

l 胸腔积液样本处理

标本于2 - 8°C 10,000 x g离心5分钟取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20°C保存。避免反复冻融。

l 支气管肺泡灌洗液样本处理

l 红细胞裂解液样本处理

取100 μL全血，于2 - 8°C，2,000 g离心5分钟收集红细胞。去上清，加入10 mL冰的1X PBS (pH 7.2-7.4)，置于-20°C过夜。经过三轮反复冻融破坏细胞壁以后，在2 - 8°C，10,000 x g离心10分钟，取上清。上清经5,000倍稀释后即可立即检测；或进行分装，并将标本放于-20°C保存，但应避免反复冻融。解冻后的样品应再次离心，然后检测。

l 脑脊液样本处理

l 腹水样本处理

l 唾液样本处理

l 粪便样本处理

如样品为固体(如粪便)则按1:10的比例加入样本稀释液(0.1克加入1 mL样本稀释液)；样品为拭子，加入1 mL样本稀释液，离心后取上清加样。

l 植物组织样本处理

植物组织(研磨法)：取500mg植物组织，用1X PBS清洗组织表面。剪成小块放入组织研磨器(匀浆管)中，加入适量的1X PBS，充分研磨样本，将匀浆后的组织转移到离心管中于2 - 8°C 5,000 x g离心5分钟取上清。取适量上清液立即进行实验，或将上清分装保存于-20°C或-80°C。解冻后的样品应再次离心，然后检测。避免反复冻融。

植物组织(液氮法)：取500mg植物组织，用纯水清洗组织表面，然后晾干。放在研钵内，加入液氮后快速研磨成细分状。加入500 μL的1X PBS混匀后5,000 x g离心5分钟取上清。取适量上清液立即进行实验，或将上清分装保存于-20°C或-80°C。解冻后的样品应再次离心，然后检测。避免反复冻融。